IL-22Rα1 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-404104-ACT

O gene humano **IL22RA1** codifica a subunidade alfa 1 do receptor de IL-22 (IL-22Rα1), uma cadeia de receptor de citocinas do tipo II que se associa a **IL10RB** para formar o complexo receptor funcional de IL-22 em células epiteliais e de barreira tecidual. A ligação do ligante ativa a sinalização **JAK/STAT**, com fosforilação proeminente de **STAT3**, e interage com as vias **MAPK** e **PI3K/AKT** para regular programas antimicrobianos, a restituição da mucosa e a expressão de genes inflamatórios. A sinalização mediada por IL-22Rα1 está ligada à integridade da barreira na pele, no pulmão e em tecidos gastrointestinais, sendo frequentemente estudada em contextos de inflamação crônica e desregulação epitelial. Alterações na expressão de **IL22RA1** ou na atividade da via têm sido associadas a doenças inflamatórias e à biologia de tumores epiteliais, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de respostas teciduais induzidas por citocinas.

IL-22Rα1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de IL22RA1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

IL-22Rα1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus IL22RA1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição IL22RA1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de IL-22Rα1. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus IL22RA1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de IL-22Rα1 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via IL-22Rα1 em células tumorais com expressão de IL22RA1 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.