IL-22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403228

Übersicht

Humanes IL22 kodiert Interleukin-22 (IL-22), ein Zytokin, das überwiegend von Th17-/Th22-Zellen und angeborenen lymphoiden Zellen produziert wird und über den IL-22R1/IL-10R2-Rezeptorkomplex in epithelialen und stromalen Kompartimenten signalisiert. IL-22 aktiviert eine JAK1/TYK2-abhängige STAT3-Signalübertragung und greift in MAPK- und PI3K-Signalwege ein, um Barriereintegrität, die Expression antimikrobieller Peptide, die Schleimproduktion sowie Gewebereparaturprogramme an mukosalen Oberflächen zu regulieren. Eine fehlregulierte IL-22-Aktivität wurde mit entzündlichen Schaltkreisen in Verbindung gebracht, die Immunzellen mit Epithelien koppeln, etwa bei Erkrankungen von Haut, Lunge und Gastrointestinaltrakt, und sie kann kontextabhängig tumorassoziierte Entzündung und epitheliale Proliferation modulieren. Diese Eigenschaften machen IL22 zu einem nützlichen Ziel zur Untersuchung des Immun–Epithel-Kreuzgesprächs, der Barrierebiologie und zytokingetriebener transkriptioneller Antworten.

Das IL-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL22-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL22-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL22 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-22-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL22-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-22-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf IL22-Exone abzielen, die für die IL-22-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL22-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL22-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-22 HDR-Plasmid (h) und IL-22 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL22-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL22-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.