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IL-17双切口酶质粒(h) | sc-400293-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-17双切口酶质粒(h2) | sc-400293-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 IL17A 基因编码白细胞介素-17A(IL-17),这是 Th17 细胞的标志性效应细胞因子。IL-17 通过诱导趋化因子和细胞因子来募集并激活中性粒细胞,从而放大组织炎症反应。IL-17 主要通过 IL-17RA/IL-17RC 受体复合体传递信号,进而激活依赖 ACT1 的 NF-κB、MAPK 和 C/EBP 通路,促进上皮细胞和基质细胞中 CXCL8/IL-8、CSF3/G-CSF 以及抗菌相关程序的表达。该信号轴有助于黏膜宿主防御并塑造屏障免疫;而 IL-17A 活性失调则与自身免疫及炎症性疾病背景下的慢性炎症病理相关。因此,IL17A 常被用作研究由细胞因子驱动的适应性淋巴细胞与先天效应网络之间串扰的分子抓手。
IL-17 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IL17A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IL17A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IL17A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IL17A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。