Plasmide Double Nickase (h) IL-1 beta/IL1B: sc-400078-NIC

Le gène humain **IL1B** code l’interleukine‑1 bêta (**IL‑1β**), une cytokine pro‑inflammatoire puissante produite sous forme de précurseur inactif, puis maturée par protéolyse en aval de l’activation de l’inflammasome et de l’activité de la caspase‑1. La signalisation d’IL‑1β via **IL‑1R1** et des protéines accessoires déclenche des cascades dépendantes de **MyD88**, notamment les voies **NF‑κB** et **MAPK**, induisant des cytokines secondaires, des chimiokines et des molécules d’adhérence qui coordonnent les réponses immunitaires innées. **IL1B** est étroitement lié au recrutement des cellules inflammatoires, à la réponse fébrile et au remodelage tissulaire, et une expression dysrégulée est associée à la pathobiologie des inflammations chroniques et des maladies auto‑immunes. En tant que nœud central des réseaux de cytokines, **IL1B** est largement étudié en biologie des macrophages, dans la signalisation de l’inflammasome et dans des modèles d’inflammation stérile et d’activation immunitaire induite par l’infection.

IL-1 beta/IL1B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL1B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL1B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL1B.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.