IKKβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400247-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IKKβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IKKβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase IKKβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IKBKB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IKKβ Anticorpo (H-4): sc-8014
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IKKβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400247-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IKKβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400247-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IKBKB codifica a IKKβ, o núcleo catalítico do complexo IKK, que fosforila proteínas IκB para desencadear sua ubiquitinação e degradação, permitindo a translocação nuclear de fatores de transcrição NF-κB. Por meio dessa via canônica de NF-κB, a IKKβ integra sinais de receptores como TNFR e TLR/IL-1R para coordenar a expressão de genes inflamatórios, respostas imunes inatas, programas de sobrevivência celular e adaptação ao estresse. A atividade desregulada de IKBKB tem sido associada à sinalização persistente de NF-κB observada em contextos inflamatórios e autoimunes e na biologia tumoral, onde pode influenciar a proliferação, a resistência à apoptose e redes de citocinas no microambiente. Como um nó central de sinalização, a IKKβ é frequentemente investigada por seus papéis na transcrição induzida por citocinas, no crosstalk de vias com MAPK e respostas a interferons, e em alterações do fosfoproteoma dependentes do estímulo.
IKKβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IKBKB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IKBKB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IKBKB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IKBKB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.