Plásmido Doble Nickase (h) IKK alpha: sc-400492-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IKK alpha consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IKK alpha (h) y el plásmido de doble nickasa IKK alpha (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CHUK. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IKK alpha Anticuerpo (B-8): sc-7606
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IKK alpha | sc-400492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IKK alpha | sc-400492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHUK codifica IKK alfa (IKKα), una subunidad catalítica del complejo quinasa de IκB que regula la señalización de NF-κB mediante el control dependiente de fosforilación de la estabilidad de IκB y de los programas transcripcionales aguas abajo. Más allá de la activación canónica de NF-κB, IKKα desempeña un papel destacado en la señalización no canónica de NF-κB a través del procesamiento de NF-κB2 p100 a p52, influyendo en la organogénesis linfoide, la maduración de las células B y la expresión de genes inflamatorios. IKKα también se interconecta con vías que gobiernan la supervivencia celular, la diferenciación y las respuestas al estrés, vinculando la actividad de CHUK con una regulación dependiente del contexto de la proliferación y la apoptosis. La actividad desregulada del eje IKKα/NF-κB se estudia con frecuencia en la biología tumoral asociada a la inflamación, la desregulación inmunitaria y los mecanismos de enfermedades inflamatorias crónicas.
IKK alpha El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CHUK en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CHUK. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CHUK. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CHUK alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.