Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP7 Double Nickase Plasmid (h): sc-418272-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IGFBP7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IGFBP7 Double-Nickase-Plasmid (h) und IGFBP7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IGFBP7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IGFBP7: sc-365293
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IGFBP7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-418272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP7 (insulinähnliches Wachstumsfaktor-bindendes Protein 7) ist ein sezerniertes Glykoprotein, das die IGF-/Insulinsignalgebung moduliert, indem es die Verfügbarkeit von Liganden und die Rezeptorbindung reguliert, und so Zellwachstum, Adhäsion und seneszenzassoziierte Programme beeinflusst. Es trägt zu Interaktionen mit der extrazellulären Matrix und zu stressresponsiver Signalübertragung bei und überschneidet sich mit Signalwegen, die die Endothelbiologie, Gewebeumbauprozesse und inflammatorische Mikroumgebungen prägen. Eine veränderte IGFBP7-Expression wurde in Zusammenhängen von Fibrose, vaskulärer Dysfunktion und krebsassoziiertem stromalem Remodeling beschrieben, wobei sie Proliferation und Zell-Matrix-Dynamik beeinflussen kann. Daher wird IGFBP7 häufig als Knotenpunkt untersucht, der Wachstumsfaktorsignalgebung mit extrazellulärer Regulation und zellulären Zustandsübergängen verknüpft.
IGFBP7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IGFBP7-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IGFBP7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IGFBP7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IGFBP7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.