Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400915-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IGFBP1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IGFBP1 Double-Nickase-Plasmid (h) und IGFBP1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IGFBP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IGFBP1: sc-55474
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IGFBP1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP1 kodiert das insulinähnliche Wachstumsfaktor-Bindungsprotein 1, einen sezernierten Regulator, der an IGF‑I und IGF‑II bindet, um deren Bioverfügbarkeit, Rezeptorbindung und nachgeschaltete Signalübertragung über die PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege zu modulieren. Die Expression von IGFBP1 wird stark durch metabolische und hormonelle Signale beeinflusst, darunter Insulin, Glukokortikoide und der Nährstoffstatus, was es mit der hepatischen Glukosehomöostase und der systemischen Energiebilanz verknüpft. Durch das Abpuffern der IGF-Aktivität kann IGFBP1 Programme der Zellproliferation, des Überlebens und der Differenzierung in endokrinen und parakrinen Kontexten mitgestalten. Veränderte IGFBP1-Spiegel wurden mit metabolischer Dysregulation sowie mit Veränderungen der IGF-Achsen-Signalgebung in unterschiedlichsten pathophysiologischen Zuständen in Verbindung gebracht, was seinen Nutzen als mechanistischer Knotenpunkt in Studien zur Wachstumsfaktor-Signalgebung und zum Stoffwechsel unterstreicht.
IGFBP1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IGFBP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IGFBP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IGFBP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IGFBP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.