Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGF2BP3 Double Nickase Plasmid (h): sc-402603-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IGF2BP3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IGF2BP3 Double-Nickase-Plasmid (h) und IGF2BP3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IGF2BP3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IGF2BP3: sc-365640
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IGF2BP3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402603-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGF2BP3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402603-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGF2BP3 (IMP3) ist ein konserviertes RNA-bindendes Protein, das m6A-modifizierte Transkripte erkennt und während der Entwicklung sowie bei Zellzustandsübergängen die Lokalisation, Stabilität und Translation von mRNA reguliert. Es moduliert posttranskriptionelle Programme der Genregulation, die mit Proliferation, Migration und Stressantworten verknüpft sind, und beeinflusst Signalwege wie PI3K–AKT und MAPK durch die Stabilisierung von mRNAs, die mit Wachstum und Überleben assoziiert sind. IGF2BP3 wird in malignen Kontexten häufig erneut exprimiert und als Marker einer aggressiven Tumorbiologie verwendet, wobei es die epithelial–mesenchymale Transition und eine veränderte metabolische Verschaltung unterstützen kann. Diese Eigenschaften machen IGF2BP3 zu einem häufigen Ziel für die Untersuchung onkogener RNA-Regulons, von m6A-Reader-Mechanismen und der kontextabhängigen Kontrolle der Genexpression.
IGF2BP3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IGF2BP3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IGF2BP3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IGF2BP3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IGF2BP3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.