Plásmido Doble Nickase (h) IGF-1 Receptor α/β/IGF1R: sc-400084-NIC

IGF1R codifica el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1, una tirosina quinasa receptora α/β unida por puentes disulfuro que transmite señales de IGF para regular la proliferación, la supervivencia, el metabolismo y la diferenciación. La unión del ligando promueve la autofosforilación del receptor e involucra a las proteínas adaptadoras IRS/SHC para activar las vías de señalización PI3K–AKT–mTOR y RAS–RAF–MEK–ERK, coordinando la progresión del ciclo celular y respuestas antiapoptóticas. La actividad de IGF1R se entrecruza con la señalización de integrinas y con la regulación por retroalimentación de las vías de insulina/IGF, influyendo en las respuestas celulares al estrés y en programas anabólicos de crecimiento. La desregulación de la señalización de IGF1R se asocia con transformación oncogénica, mecanismos de resistencia a terapias y un control del crecimiento alterado en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su utilidad como nodo de vía en estudios mecanísticos.

IGF-1 Receptor α/β/IGF1R El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IGF1R en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IGF1R. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IGF1R. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IGF1R alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.