Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) IFN-γRα: sc-421051-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IFN-γRα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFN-γRα Double Nickase (m) et le plasmide IFN-γRα Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifngr1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFN-γRα Antibody (GIR-94): sc-12755
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IFN-γRα | sc-421051-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IFN-γRα | sc-421051-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifngr1 code la chaîne alpha du récepteur murin de l’interféron gamma (IFN-γRα), la sous-unité de liaison au ligand indispensable à la réponse cellulaire à l’IFN-γ. Lors de l’engagement du récepteur, IFN-γRα coopère avec IFNGR2 pour activer JAK1/JAK2 et la signalisation STAT1 en aval, déclenchant des programmes transcriptionnels qui régulent la présentation de l’antigène, l’activation des macrophages et les fonctions effectrices antimicrobiennes. Cet axe façonne l’immunité de type Th1 et le dialogue inflammatoire, en influençant les réponses de la barrière épithéliale et le recrutement des leucocytes. Une dérégulation de la signalisation IFN-γ–JAK/STAT a été associée à une immunopathologie et à des phénotypes de défense de l’hôte altérés, faisant d’Ifngr1 un locus utile pour des études mécanistiques dans des modèles de maladies immunitaires et inflammatoires.
IFN-γRα Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifngr1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifngr1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifngr1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifngr1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.