IFN-α5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421042

Descripción general

El gen murino **Ifna5** codifica el interferón‑α5 (IFN‑α5), un interferón de tipo I que coordina las defensas antivirales innatas y modela las respuestas inmunitarias adaptativas posteriores. El IFN‑α5 señaliza a través del complejo receptor IFNAR para activar las vías JAK–STAT, induciendo genes estimulados por interferón que restringen la replicación viral, modulan la presentación de antígenos y regulan programas de supervivencia celular. Este eje de citocinas influye en el tono inflamatorio de los tejidos y se cruza con la señalización de receptores de reconocimiento de patrones, incluidas las vías RIG‑I/MAVS y cGAS–STING. La señalización desregulada de interferones de tipo I se ha implicado en la susceptibilidad a infecciones y en fenotipos inflamatorios mediatos por el sistema inmunitario, relevantes para la autoinmunidad y los microambientes inmunitarios tumorales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFN-α5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifna5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifna5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifna5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFN-α5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifna5 para la investigación de la señalización de IFN-α5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifna5 críticos para la función de IFN-α5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifna5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFN-α5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFN-α5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifna5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFN-α5 (m) y el plásmido HDR IFN-α5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifna5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifna5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.