Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IFIT3 Double Nickase Plasmid (h): sc-403557-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IFIT3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IFIT3 Double-Nickase-Plasmid (h) und IFIT3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IFIT3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IFIT3: sc-393512
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IFIT3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403557-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFIT3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403557-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Interferoninduziertes Protein mit Tetratricopeptid-Wiederholungen 3 (IFIT3) ist das Produkt eines durch Interferon stimulierten Gens und beteiligt sich an der angeborenen antiviralen Abwehr nachgeschaltet an Typ‑I/III‑Interferon- und Pattern-Recognition-Rezeptor-Signalwegen. IFIT3 bildet Komplexe mit anderen Mitgliedern der IFIT-Familie und moduliert RNA-Erkennung, Translationskontrolle sowie die Verstärkung JAK–STAT‑getriebener Interferonantworten, wodurch es die Expression umfassenderer antiviraler Effektorprogramme beeinflusst. Über diese Aktivitäten trägt IFIT3 zur zellulären Einschränkung der Virusreplikation bei und prägt inflammatorische Signalnetzwerke wie NF‑κB- und IRF‑abhängige Transkription. Eine dysregulierte IFIT3-Expression wurde mit veränderter antiviraler Reaktionsfähigkeit und inflammatorischen Zuständen in Verbindung gebracht und macht IFIT3 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien in der Infektionsbiologie, Immunologie und in der krebsbezogenen Interferon-Signalgebung.
IFIT3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IFIT3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IFIT3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IFIT3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IFIT3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.