Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-202 (m): sc-424028
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IFI-202 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IFI-202, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFI-202 Antibody (F-7): sc-166253
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-202 (m) | sc-424028 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ifi202b chez la souris code IFI‑202, un membre de la famille p200 (PYHIN) induit par l’interféron, impliqué dans la régulation de l’immunité innée et le contrôle des décisions de destinée cellulaire. IFI‑202 a été associé à la modulation des réponses aux dommages de l’ADN, de la progression du cycle cellulaire et de la signalisation apoptotique, avec des liens fonctionnels aux réseaux interféron/ISG qui façonnent l’expression des gènes inflammatoires. Dans les cellules immunitaires et en contexte de stimulation par l’interféron, une activité altérée d’Ifi202b est associée à une homéostasie immunitaire dérégulée et a été étudiée en lien avec des phénotypes de type auto-immun et des mécanismes de maladies inflammatoires dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-202 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ifi202b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ifi202b, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ifi202b à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IFI-202.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ifi202b pour l'étude de la signalisation de IFI-202, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ifi202b essentiels à la fonction de IFI-202
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ifi202b pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IFI-202 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le IFI-202 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ifi202b. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IFI-202 plasmide HDR (m) et le IFI-202 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ifi202b pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ifi202b définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.