Plásmido Doble Nickase (h) ICAM-2: sc-403029-NIC

ICAM2 codifica la molécula de adhesión intercelular 2 (ICAM-2), una glucoproteína de superficie celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas, expresada de forma destacada en células endoteliales y leucocitos. ICAM-2 actúa como ligando de adhesión para integrinas β2 como LFA-1 (ITGAL/ITGB2), favoreciendo el anclaje de los leucocitos, la adhesión firme y la migración transendotelial durante la vigilancia inmunitaria y la inflamación. A través de estas interacciones, contribuye a la regulación de la dinámica del citoesqueleto, la polaridad celular y la organización de las uniones en contextos vasculares e inmunitarios. La señalización de adhesión desregulada que involucra a miembros de la familia ICAM se ha implicado en lesión tisular inflamatoria, disfunción vascular e interacciones tumor–sistema inmunitario, lo que convierte a ICAM2 en un punto de interés útil para estudios mecanísticos del tráfico de células inmunitarias y la biología endotelial.

ICAM-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ICAM2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ICAM2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ICAM2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ICAM2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.