HSPC144 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412026

Descripción general

THYN1 (también conocido como HSPC144) codifica una proteína nuclear de timocitos implicada en la regulación de la apoptosis y el control del ciclo celular, con funciones descritas en el mantenimiento de la homeostasis celular durante la proliferación y el estrés. La proteína se ha relacionado con procesos nucleares que influyen en señales de supervivencia y puede converger con vías que regulan la muerte celular programada, incluidos mecanismos dependientes de caspasas. Se han observado alteraciones en la expresión de THYN1 en múltiples contextos tumorales, lo que sugiere relevancia para la transformación oncogénica y la aptitud de las células tumorales. En consecuencia, THYN1 se estudia con frecuencia en modelos de biología hematopoyética y de tejidos sólidos para aclarar cómo la regulación de la apoptosis contribuye a fenotipos asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HSPC144 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen THYN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del THYN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de THYN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HSPC144.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en THYN1 para la investigación de la señalización de HSPC144, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de THYN1 críticos para la función de HSPC144
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de THYN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HSPC144 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HSPC144 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus THYN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HSPC144 (h) y el plásmido HDR HSPC144 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología THYN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana THYN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.