Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSPA8/HSC70 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418508-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSPA8/HSC70O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSPA8/HSC70 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSPA8/HSC70 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPA8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSPA8/HSC70 Anticorpo (B-6): sc-7298
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSPA8/HSC70 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418508-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSPA8/HSC70 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418508-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA8 codifica a chaperona HSC70, expressa de forma constitutiva, um componente central da família HSP70 que se liga a polipeptídeos nascente ou desnaturados por estresse para promover o dobramento, o redobramento e a prevenção da agregação. A HSC70 participa de ciclos de chaperona dependentes de ATP com co-chaperonas como as DNAJs e fatores de troca de nucleotídeos, sustentando a proteostase no citosol e em organelas. Também é um regulador-chave da autofagia mediada por chaperona, da remoção do revestimento de clatrina durante a endocitose e de vias de controle de qualidade proteica, incluindo a degradação pelo sistema ubiquitina–proteassoma. A desregulação da proteostase e do tráfego associados a HSPA8/HSC70 tem sido implicada em neurodegeneração, tolerância ao estresse em células cancerosas e biologia de doenças infecciosas, tornando-o um alvo amplamente estudado em redes de homeostase celular.
HSPA8/HSC70 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPA8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPA8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPA8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPA8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.