Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP 60 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400336-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP 60O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSP 60 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSP 60 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP 60 Anticorpo (LK1): sc-59567
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP 60 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400336-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 60 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400336-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPD1 codifica a chaperonina mitocondrial HSP60 (HSPD1), um componente central do sistema de chaperoninas que sustenta o dobramento e a montagem, dependentes de ATP, de proteínas mitocondriais importadas. Ao manter a proteostase na matriz mitocondrial, a HSP60 influencia a fosforilação oxidativa, a biogênese mitocondrial e as respostas celulares ao estresse, podendo modular a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas na mitocôndria (UPRmt). Alterações em HSPD1 afetam o metabolismo mitocondrial, o manejo de espécies reativas de oxigênio e vias relacionadas à apoptose, associando função ou expressão alteradas da HSP60 à neurodegeneração, a fenótipos inflamatórios e à remodelação metabólica ligada ao câncer. Como chaperona altamente conservada, a HSP60 também é relevante para estudar o controle de qualidade mitocondrial e o estresse proteotóxico em diversos contextos experimentais.
HSP 60 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.