HoxA11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405264

Descripción general

HOXA11 codifica el factor de transcripción homeobox HoxA11, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que controla programas de patrón del desarrollo y de diferenciación mesenquimal. En células humanas, HoxA11 contribuye a redes transcripcionales que gobiernan la morfogénesis de las extremidades y del tracto urogenital, y se ha implicado en la decidualización del estroma endometrial mediante un crosstalk dependiente del contexto con la señalización de hormonas esteroideas y la remodelación de la cromatina. La expresión desregulada de HOXA11 o paisajes regulatorios alterados se han asociado con trastornos reproductivos y anomalías del desarrollo, y las perturbaciones de los clústeres HOX son rasgos recurrentes en múltiples tipos de cáncer, donde pueden influir en la proliferación y la identidad de linaje. Como regulador transcripcional nuclear, HoxA11 ofrece un punto de entrada manejable para diseccionar circuitos de regulación génica y transiciones de estados epigenéticos en modelos relevantes para el desarrollo y la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HoxA11 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HOXA11 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HOXA11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HOXA11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HoxA11.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HOXA11 para la investigación de la señalización de HoxA11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HOXA11 críticos para la función de HoxA11
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HOXA11 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HoxA11 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HoxA11 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HOXA11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HoxA11 (h) y el plásmido HDR HoxA11 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HOXA11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HOXA11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.