Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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HoxA10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420900
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HoxA10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HoxA10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HoxA10 Anticorpo (E-11): sc-271428
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HoxA10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420900 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hoxa10 codifica o fator de transcrição homeobox HoxA10, um regulador de ligação ao DNA que padroniza o eixo embrionário ântero-posterior e especifica a identidade regional nos tratos urogenital e reprodutivo em desenvolvimento. Em camundongos, o HoxA10 contribui para redes regulatórias gênicas do desenvolvimento ao coordenar programas transcricionais que controlam a determinação do destino celular, a diferenciação e a morfogênese, com efeitos dependentes do contexto sobre a proliferação e a remodelação tecidual. Sua atividade se integra a cofatores HOX/TALE mais amplos e à regulação da cromatina para estabelecer estados transcricionais específicos de segmento. A expressão desregulada de HOXA10 tem sido associada a alterações na diferenciação hematopoética e a programas transcricionais leucemogênicos, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de distúrbios do desenvolvimento e de especificação de linhagens relevante para o câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxA10 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hoxa10 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hoxa10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hoxa10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxA10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hoxa10 para a investigação da sinalização de HoxA10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hoxa10 críticos para a função HoxA10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hoxa10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HoxA10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HoxA10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hoxa10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxA10 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HoxA10 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hoxa10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hoxa10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.