HLX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420868
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HLX1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HLX1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HLX1 Anticuerpo (1B9): sc-293328
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HLX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420868 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Hlx codifica HLX1, un factor de transcripción homeobox que regula programas de expresión génica que controlan el patrón embrionario y la especificación de linajes. En sistemas de ratón, HLX1 está implicado en la diferenciación hematopoyética y en el desarrollo de células inmunitarias, lo que lo vincula a redes transcripcionales que coordinan la proliferación, la migración y la maduración. A través de su homeodominio de unión al ADN, HLX1 influye en vías reguladoras del desarrollo y del sistema inmunitario aguas abajo, ayudando a definir decisiones de destino celular en múltiples tejidos. La actividad desregulada de Hlx se ha asociado con estados de diferenciación alterados y fenotipos relevantes para defectos del desarrollo y modelos de enfermedades relacionadas con el sistema inmunitario.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HLX1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hlx en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hlx junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hlx tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HLX1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hlx para la investigación de la señalización de HLX1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Hlx críticos para la función de HLX1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hlx para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HLX1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HLX1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hlx. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HLX1 (m) y el plásmido HDR HLX1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hlx para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hlx definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.