HIVEP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421334

Descripción general

Hivep3 codifica HIVEP3, un gran factor de transcripción con dedos de zinc que se une a elementos de ADN tipo κB y modula programas de expresión génica sensibles a estímulos. HIVEP3 se asocia con la regulación de redes de señalización inmunitaria e inflamatoria, incluidas las respuestas transcripcionales aguas abajo de NF-κB y vías relacionadas que coordinan la producción de citocinas, la activación de linfocitos y las respuestas al estrés celular. En sistemas murinos, la actividad alterada de HIVEP3 se ha relacionado con una homeostasis inmunitaria desregulada y fenotipos inflamatorios, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de la autoinmunidad y la inflamación tisular. Dado que integra la unión al ADN dependiente de secuencia con un control transcripcional amplio, Hivep3 también se utiliza como un nodo para estudiar los circuitos de regulación génica y las transiciones de estado celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HIVEP3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hivep3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hivep3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hivep3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HIVEP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hivep3 para la investigación de la señalización de HIVEP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hivep3 críticos para la función de HIVEP3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hivep3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HIVEP3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HIVEP3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hivep3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HIVEP3 (m) y el plásmido HDR HIVEP3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hivep3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hivep3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.