Plásmido Doble Nickase (h) Histone Deacetylase 4 (HDAC4): sc-400388-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone Deacetylase 4 (HDAC4) consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone Deacetylase 4 (HDAC4) (h) y el plásmido de doble nickasa Histone Deacetylase 4 (HDAC4) (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HDAC4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Histone Deacetylase 4 Anticuerpo (A-4): sc-46672
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone Deacetylase 4 (HDAC4) | sc-400388-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Histone Deacetylase 4 (HDAC4) | sc-400388-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El HDAC4 humano codifica la histona desacetilasa 4, una HDAC de clase IIa que se desplaza entre el núcleo y el citoplasma para modular la accesibilidad de la cromatina y los programas transcripcionales. HDAC4 actúa en complejos multiproteicos correpresores e integra la señalización de quinasas dependientes de calcio/calmodulina y de 14-3-3 para regular la expresión génica mediada por MEF2, la diferenciación celular y la transcripción sensible al estrés. Mediante un control dependiente de la desacetilación de sustratos histónicos y no histónicos, HDAC4 contribuye a vías que gobiernan el desarrollo muscular y neuronal, la plasticidad sináptica y la homeostasis metabólica. La actividad y localización desreguladas de HDAC4 se han vinculado a estados epigenéticos aberrantes observados en contextos neurodel desarrollo, neurodegenerativos y oncogénicos, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la represión transcripcional.
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HDAC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HDAC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HDAC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HDAC4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.