Hex Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420852

Descripción general

Hhex (Hex) es un factor de transcripción homeobox que regula el patrón embrionario temprano y la organogénesis, con funciones destacadas en la especificación del endodermo anterior y en el desarrollo de los linajes de hígado, páncreas y tiroides en el ratón. Al unirse al ADN mediante su homeodominio, Hex integra señales del desarrollo para controlar programas de expresión génica que influyen en las decisiones de destino celular, la morfogénesis y la diferenciación tisular. La actividad de Hhex se interseca con vías que gobiernan el desarrollo endodérmico y vascular y se ha relacionado con la regulación de redes génicas hematopoyéticas y endoteliales. La expresión o función desregulada de Hhex se asocia con anomalas del desarrollo y se ha implicado en estados de diferenciación alterados relevantes para la biología del cáncer y modelos de enfermedades hematológicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Hex (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hhex en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hhex junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hhex tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Hex.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hhex para la investigación de la señalización de Hex, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hhex críticos para la función de Hex
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hhex para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Hex CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Hex CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hhex. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Hex (m) y el plásmido HDR Hex (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hhex para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hhex definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.