Plásmido Doble Nickase (h) HDC: sc-403606-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HDC consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HDC (h) y el plásmido de doble nickasa HDC (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HDC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HDC | sc-403606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HDC | sc-403606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La histidina descarboxilasa (HDC) cataliza la conversión dependiente de fosfato de piridoxal de L-histidina en histamina, una amina bioactiva que regula la inflamación, la secreción de ácido gástrico, la neurotransmisión y la permeabilidad vascular. En tejidos inmunitarios y de barrera, la producción de histamina impulsada por HDC configura las respuestas efectoras de mastocitos y basófilos mediante la señalización de receptores de histamina y las vías posteriores de GPCR que modulan la liberación de citocinas y el tráfico de leucocitos. La actividad de HDC también se vincula a programas metabólicos y redox a través del recambio de aminas biógenas y puede influir en la comunicación célula–célula dentro de los microambientes tisulares. La expresión desregulada de HDC o la biosíntesis de histamina se ha asociado con inflamación alérgica, trastornos gastrointestinales y procesos neuroinflamatorios, lo que convierte a HDC en una diana útil para estudios mecanísticos de la señalización histaminérgica.
HDC El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HDC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HDC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HDC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HDC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.