Plasmide Double Nickase (h) HAPLN1: sc-403874-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HAPLN1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HAPLN1 Double Nickase (h) et le plasmide HAPLN1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HAPLN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HAPLN1 | sc-403874-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HAPLN1 | sc-403874-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HAPLN1 (protéine de liaison 1 de l’hyaluronane et des protéoglycanes) code une glycoprotéine de la matrice extracellulaire qui stabilise les agrégats d’hyaluronane avec les protéoglycanes à sulfate de chondroïtine, soutenant l’assemblage de la matrice, son hydratation et les propriétés biomécaniques des tissus. HAPLN1 contribue aux interactions cellule–matrice et aux programmes d’organisation de la MEC qui influencent l’adhésion, la migration et la mécanotransduction, en particulier dans les tissus conjonctifs et les microenvironnements de type cartilagineux. Des altérations de l’expression de HAPLN1 et de son activité de liaison matricielle ont été associées à un remodelage stromal dérégulé, à des voies liées à la fibrose et à la composition du microenvironnement tumoral, ce qui en fait un nœud utile pour étudier la dynamique de la matrice extracellulaire dans des modèles de maladies humaines. En tant que facteur sécrété/associé à la MEC, HAPLN1 est fréquemment étudié en biologie des systèmes de la matrice, notamment dans le renouvellement matriciel, le remodelage inflammatoire et la formation de niches liées aux métastases.
HAPLN1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HAPLN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HAPLN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HAPLN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HAPLN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.