GSG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420702

概要

マウスGsg1はGSG1をコードしており、GSG1は生殖細胞関連の膜タンパク質で、精巣で高発現し、精子形成の後期段階に関連しています。これまでに報告された知見から、雄性生殖細胞の分化および精子成熟における役割が示唆されており、膜構造の形成、タンパク質輸送、精子形成期のリモデリングなどの細胞プロセスが関与すると考えられています。精子形成関連遺伝子の適切な発現は生殖能に必須であるため、Gsg1の撹乱は、男性生殖表現型の研究（不妊に関連する機序や精巣特異的遺伝子制御など）において重要な対象となります。

GSG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGsg1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gsg1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gsg1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GSG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GSG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gsg1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GSG1の機能に不可欠なGsg1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gsg1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GSG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGSG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gsg1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GSG1 HDRプラスミド（m）および GSG1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGsg1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGsg1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。