GSG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420702

Descripción general

El gen murino **Gsg1** codifica **GSG1**, una proteína de membrana asociada a células germinales, enriquecida en el testículo y vinculada a etapas tardías de la espermatogénesis. La biología descrita respalda su participación en la diferenciación de células germinales masculinas y en la maduración del espermatozoide, implicando procesos celulares como la organización de membranas, el tráfico de proteínas y la remodelación espermiogénica. Dado que la expresión adecuada de los genes de la espermatogénesis es esencial para la fertilidad, la alteración de **Gsg1** es relevante para estudios de fenotipos reproductivos masculinos, incluidos los mecanismos asociados a la infertilidad y la regulación génica específica del testículo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GSG1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gsg1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gsg1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gsg1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GSG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gsg1 para la investigación de la señalización de GSG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gsg1 críticos para la función de GSG1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gsg1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GSG1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GSG1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gsg1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GSG1 (m) y el plásmido HDR GSG1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gsg1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gsg1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.