Plasmide CRISPR/Cas9 KO GSC (m): sc-420701
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GSC Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GSC, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GSC Antibody (L-36): sc-81964
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GSC (m) | sc-420701 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Gsc** code le facteur de transcription à homéoboîte **GSC**, un régulateur conservé de l’établissement des patrons embryonnaires et de la morphogenèse tissulaire. GSC agit en aval de signaux majeurs du développement, notamment les voies **TGF-β/BMP** et **Wnt**, afin de coordonner des programmes d’expression génique qui contrôlent les mouvements de gastrulation, la spécification des axes et le développement craniofacial. Une régulation altérée des réseaux transcriptionnels à homéoboîte est largement impliquée dans les malformations congénitales ainsi que dans des contextes où des programmes développementaux sont réactivés dans des modèles de maladie. En conséquence, **Gsc** est fréquemment étudié dans des analyses du contrôle transcriptionnel, de l’engagement de lignée et des circuits de régulation génique dans des systèmes murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GSC (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Gsc dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Gsc, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Gsc à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GSC.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Gsc pour l'étude de la signalisation de GSC, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Gsc essentiels à la fonction de GSC
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Gsc pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GSC plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le GSC plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Gsc. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GSC plasmide HDR (m) et le GSC (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Gsc pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Gsc définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.