GPRC5B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r): sc-437288

Übersicht

GPRC5B (G-Protein-gekoppelter Rezeptor der Klasse C, Gruppe 5, Mitglied B) ist ein verwaistes, GPCR-ähnliches Membranprotein, das an der Regulation der Zellsignalübertragung und des Membrantransports in mehreren Geweben beteiligt ist, darunter Gehirn, Fettgewebe und immunrelevante Kompartimente. Es wurde mit der Modulation der Aktivität der MAPK/ERK- und PI3K–AKT-Signalwege in Verbindung gebracht und beeinflusst dadurch Prozesse wie Proliferation, Differenzierung und inflammatorische Signalgebung. In der Stoffwechselbiologie ist GPRC5B mit der Insulinsignalübertragung und der Funktion von Adipozyten assoziiert; eine veränderte Expression wurde in Zusammenhängen von Adipositas und damit verbundenen kardiometabolischen Phänotypen berichtet. Seine Expressionsmuster und Signalverknüpfungen machen es zudem relevant für die Untersuchung von Neuroinflammation und stressresponsiven Signalwegen in zellulären und physiologischen Rattenmodellen.

Das GPRC5B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in rat-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GPRC5B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GPRC5B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die GPRC5B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GPRC5B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) und vom GPRC5B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GPRC5B HDR-Plasmid (r) und GPRC5B HDR-Plasmid (r2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.