GPR87 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429972-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR87O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR87 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GPR87 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Gpr87. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR87 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429972-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Gpr87** de camundongo codifica o **GPR87**, um receptor acoplado à proteína G do tipo rodopsina, implicado em conectar sinais extracelulares à sinalização intracelular por segundos mensageiros e a programas transcricionais. Atividades descritas relacionam o GPR87 à regulação da progressão do ciclo celular, à sinalização responsiva ao estresse e à homeostase epitelial por meio de vias associadas a GPCRs, como **MAPK/ERK** e processos dependentes de **PI3K**. A expressão alterada de GPR87 tem sido associada a fenótipos proliferativos e à biologia de tumores epiteliais, tornando-o um alvo útil para dissecar redes de sinalização de GPCRs específicas do contexto. Em modelos murinos e sistemas celulares, a perturbação de **Gpr87** permite estudos mecanísticos de sinalização dirigida por receptor, controle do estado de diferenciação e crosstalk entre vias.
GPR87 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Gpr87 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Gpr87. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Gpr87. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Gpr87 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.