GPR38 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406289

Descripción general

El receptor de motilina (MLNR), también conocido como GPR38, es un receptor acoplado a proteína G de clase A que se une a la hormona peptídica motilina para coordinar la motilidad gastrointestinal interdigestiva y regular la contractilidad del músculo liso. Tras su activación, GPR38 interactúa con proteínas G heterotriméricas para influir en la señalización de segundos mensajeros, incluida la movilización de calcio y las vías de quinasas aguas abajo que modulan la excitabilidad en circuitos entéricos y gástricos. La expresión y la señalización de MLNR se utilizan para investigar los mecanismos que controlan los complejos motores migratorios, el vaciamiento gástrico y la comunicación neuroendocrina dentro del intestino. La actividad desregulada del receptor de motilina se ha estudiado en el contexto de trastornos gastrointestinales funcionales y fenotipos de motilidad intestinal alterada, lo que convierte a MLNR en una diana relevante para estudios centrados en vías de señalización en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR38 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MLNR en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MLNR junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MLNR tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR38.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MLNR para la investigación de la señalización de GPR38, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MLNR críticos para la función de GPR38
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MLNR para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR38 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR38 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MLNR. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR38 (h) y el plásmido HDR GPR38 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MLNR para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MLNR definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.