GPR38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406289
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR38 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPR38, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406289 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O receptor de motilina (MLNR), também conhecido como GPR38, é um receptor acoplado à proteína G da classe A que se liga ao hormônio peptídico motilina para coordenar a motilidade gastrointestinal no período interdigestivo e regular a contratilidade do músculo liso. Após a ativação, o GPR38 recruta proteínas G heterotriméricas para influenciar a sinalização por segundos mensageiros, incluindo a mobilização de cálcio e vias de quinases a jusante que modulam a excitabilidade em circuitos entéricos e gástricos. A expressão e a sinalização de MLNR são usadas para investigar mecanismos que controlam os complexos motores migratórios, o esvaziamento gástrico e a comunicação neuroendócrina no intestino. A atividade desregulada do receptor de motilina tem sido estudada no contexto de distúrbios gastrointestinais funcionais e de fenótipos de motilidade intestinal alterada, tornando o MLNR um alvo relevante para estudos centrados em vias em modelos celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR38 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MLNR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MLNR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MLNR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR38.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MLNR para a investigação da sinalização de GPR38, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MLNR críticos para a função GPR38
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MLNR para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPR38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPR38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MLNR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR38 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPR38 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MLNR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MLNR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.