Plásmido Doble Nickase (h) GPR172B: sc-407324-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR172B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR172B (h) y el plásmido de doble nickasa GPR172B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC52A1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR172B | sc-407324-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC52A1 codifica el transportador humano de riboflavina RFVT1, también conocido como GPR172B, una proteína de membrana que media la captación celular de vitamina B2, precursora de los cofactores flavínicos FMN y FAD. Al controlar la disponibilidad intracelular de riboflavina, GPR172B influye en el metabolismo redox dependiente de flavoproteínas, la producción de energía mitocondrial y las respuestas al estrés oxidativo. La actividad de RFVT1 sostiene vías bioquímicas como la β‑oxidación de ácidos grasos y el transporte de electrones, que requieren enzimas dependientes de FAD/FMN. Las alteraciones en el transporte de riboflavina y en la homeostasis de flavinas se han asociado con disfunción metabólica y fenotipos neuromusculares vinculados a un uso deficiente de la vitamina B2.
GPR172B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC52A1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC52A1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC52A1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC52A1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.