GPR17 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402977-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR17O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR17 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR17 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR17. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GPR17 Anticorpo (A-10): sc-514723
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR17 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402977-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR17 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402977-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR17 codifica um receptor acoplado à proteína G do tipo rodopsina que integra sinais extracelulares purinérgicos e relacionados a leucotrienos cisteinílicos para modular vias intracelulares de segundos mensageiros, incluindo sinalização dependente de cAMP e de cálcio. No sistema nervoso central, a expressão de GPR17 é enriquecida em células da linhagem de oligodendrócitos e está implicada na coordenação do timing de programas de diferenciação e mielinização, conectando a atividade do receptor a sinais neuroinflamatórios e ao remodelamento tecidual. O receptor também tem sido estudado em contextos de respostas ao estresse isquêmico e de sinalização inflamatória, nos quais alterações na sinalização de GPCRs podem remodelar estados de ativação glial e redes transcricionais a jusante. Como resultado, GPR17 é um alvo útil para dissecar a regulação, mediada por GPCRs, do desenvolvimento neural, da sinalização associada à inflamação e de transições de destino celular.
GPR17 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR17 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR17. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR17. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR17 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.