Plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut8 (m): sc-424976

Présentation

Slc2a8 code le transporteur de glucose GLUT8, un transporteur facilitateur d’hexoses qui contribue à la gestion du glucose, à la fois intracellulaire et associée à la membrane, dans les cellules de souris. GLUT8 soutient l’équilibre énergétique cellulaire en régulant la disponibilité du glucose pour la glycolyse et les voies métaboliques en aval, avec des liens fonctionnels avec la détection des nutriments sensible à l’insuline et l’homéostasie métabolique spécifique aux organes. Dans des tissus spécialisés, une activité modifiée de Slc2a8 peut influencer le flux de glucose, le métabolisme oxydatif et les réponses au stress, à l’interface avec la physiologie endocrinienne et reproductive. La dérégulation des processus de transport de la famille GLUT est largement pertinente pour les modèles de dysfonctionnement métabolique et pour les études portant sur la manière dont le transport des nutriments façonne les programmes cellulaires de croissance, de différenciation et de survie.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut8 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Slc2a8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Slc2a8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Slc2a8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Glucose Transporter Glut8.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Slc2a8 pour l'étude de la signalisation de Glucose Transporter Glut8, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Slc2a8 essentiels à la fonction de Glucose Transporter Glut8
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Slc2a8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Glucose Transporter Glut8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Glucose Transporter Glut8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Slc2a8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Glucose Transporter Glut8 plasmide HDR (m) et le Glucose Transporter Glut8 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Slc2a8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Slc2a8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.