Plasmide Double Nickase (m) Glucose Transporter Glut1: sc-422998-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Glucose Transporter Glut1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Glucose Transporter Glut1 Double Nickase (m) et le plasmide Glucose Transporter Glut1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Slc2a1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Glucose Transporter Glut1 | sc-422998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Glucose Transporter Glut1 | sc-422998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc2a1 code le transporteur de glucose facilité GLUT1 (SLC2A1), un transporteur à haute affinité qui assure l’absorption basale de glucose à travers la membrane plasmique dans de nombreux types cellulaires chez la souris, notamment les lignées endothéliales et immunitaires. En contrôlant la disponibilité intracellulaire du glucose, GLUT1 soutient la glycolyse, le métabolisme oxydatif et des voies biosynthétiques qui influencent la croissance cellulaire, l’équilibre rédox et les réponses au stress. L’expression de Slc2a1 et le trafic de GLUT1 sont étroitement régulés par la détection des nutriments et la signalisation de l’hypoxie, intégrant des signaux issus de voies telles que les programmes transcriptionnels dépendants de HIF et les réseaux d’homéostasie énergétique. Une activité altérée de GLUT1 est associée à une reprogrammation métabolique dans des contextes prolifératifs et inflammatoires, et Slc2a1 est largement étudié dans des modèles de fonction neurovasculaire, d’immunométabolisme et de défauts de transport du glucose.
Glucose Transporter Glut1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Slc2a1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Slc2a1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Slc2a1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Slc2a1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.