Glucose Transporter Glut1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400174-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Glucose Transporter Glut1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Glucose Transporter Glut1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Glucose Transporter Glut1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC2A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Glucose Transporter Glut1 Anticorpo (A-4): sc-377228
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Glucose Transporter Glut1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400174-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucose Transporter Glut1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400174-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC2A1 codifica o transportador facilitador de glicose GLUT1, um transportador de alta afinidade que medeia a captação basal de glicose através da membrana plasmática para sustentar a glicólise e o metabolismo oxidativo. A atividade do GLUT1 contribui para a homeostase energética e o equilíbrio redox, influenciando a reprogramação metabólica em estados proliferativos e adaptando as células à hipóxia por meio de programas transcricionais regulados por HIF. Como determinante-chave da disponibilidade de glicose, o SLC2A1 interage com as vias de sinalização de AMPK e mTOR por meio de mecanismos de retroalimentação de detecção de nutrientes e impacta processos como angiogênese, transporte na barreira hematoencefálica e ativação de células imunes. Alterações na expressão ou na função de SLC2A1 estão associadas à desregulação metabólica e têm sido implicadas no metabolismo do câncer e em defeitos neurológicos no transporte de glicose.
Glucose Transporter Glut1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC2A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC2A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC2A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC2A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.