Plásmido Doble Nickase (h) GLTSCR1: sc-409913-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GLTSCR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GLTSCR1 (h) y el plásmido de doble nickasa GLTSCR1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GLTSCR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GLTSCR1 Anticuerpo (H-10): sc-515086
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GLTSCR1 | sc-409913-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GLTSCR1 | sc-409913-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLTSCR1 (gen de la región candidata a supresor tumoral de glioma 1) codifica una proteína nuclear implicada en la regulación de procesos asociados a la cromatina y en el control transcripcional, en consonancia con funciones en el mantenimiento de programas adecuados de expresión génica. Las interacciones descritas vinculan a GLTSCR1 con complejos y vías de regulación epigenética que influyen en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y los estados de diferenciación celular. La alteración de la expresión de GLTSCR1 o las perturbaciones genómicas se han asociado con contextos relacionados con tumores, en particular en regiones vinculadas al glioma, lo que respalda su relevancia para estudiar mecanismos de reprogramación transcripcional oncogénica. Como gen humano, GLTSCR1 se examina con frecuencia en modelos que investigan la organización nuclear, la regulación de la cromatina y las relaciones genotipo‑fenotipo en la biología de enfermedades proliferativas.
GLTSCR1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GLTSCR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GLTSCR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GLTSCR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GLTSCR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.