Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ggnbp2 (m): sc-432161

Présentation

Ggnbp2 (protéine 2 se liant à la gamétogénétine) est une protéine associée aux cellules germinales, impliquée dans la biologie de la reproduction mâle, dont l’enrichissement dans les tissus testiculaires a été rapporté, ainsi que des liens avec des processus liés à la spermatogenèse. Bien que ses partenaires moléculaires restent imparfaitement caractérisés, Ggnbp2 a été associée à la régulation de programmes transcriptionnels et des états de différenciation cellulaire au sein de la lignée germinale. La perturbation de gènes actifs dans ce contexte peut influer sur l’organisation de la chromatine, la progression méiotique et le développement des spermatozoïdes, ce qui fait de Ggnbp2 une cible d’intérêt pour l’étude des voies impliquées dans la fertilité et l’homéostasie des cellules germinales. Des profils d’expression altérés de régulateurs enrichis dans le testicule tels que Ggnbp2 sont également étudiés dans le cadre d’un contrôle aberrant du cycle cellulaire et d’une différenciation dérégulée dans des modèles pertinents pour certaines pathologies.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ggnbp2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ggnbp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ggnbp2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ggnbp2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ggnbp2.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ggnbp2 pour l'étude de la signalisation de Ggnbp2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Ggnbp2 essentiels à la fonction de Ggnbp2
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ggnbp2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Ggnbp2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Ggnbp2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ggnbp2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Ggnbp2 plasmide HDR (m) et le Ggnbp2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ggnbp2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ggnbp2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.