GDPD3 Double Nickase Plasmid (h): sc-405288-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GDPD3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GDPD3 Double-Nickase-Plasmid (h) und GDPD3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GDPD3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GDPD3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GDPD3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GDPD3 (Glycerophosphodiester-Phosphodiesterase-Domäne enthaltend 3) kodiert eine mutmaßliche Glycerophosphodiester-Phosphodiesterase, die am Phospholipid- und Glycerophosphocholin-Stoffwechsel beteiligt ist und damit den Umbau von Membranlipiden mit zellulären Signaloutputs verknüpft. Durch die Beeinflussung der Spiegel von Lysophospholipiden und verwandten Metaboliten ist GDPD3 in der Lage, Signalwege zu modulieren, die mit Membrandynamik, lipidbasierten Second Messengern und metabolischer Anpassung zusammenhängen. Veränderte Programme des Lipidstoffwechsels werden häufig in proliferativen Zuständen sowie bei Stressantworten beobachtet, was GDPD3 zu einem geeigneten Knotenpunkt macht, um lipidgetriebene Regulation von Wachstum, Überleben und entzündungsassoziierter Signalgebung zu untersuchen. Eine Fehlregulation des Phospholipid-Umsatzes wurde mit Krebs- und Stoffwechselkrankheits-Phänotypen in Verbindung gebracht, was die Untersuchung von GDPD3 in krankheitsrelevanten Zellmodellen unterstützt.
GDPD3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GDPD3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GDPD3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GDPD3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GDPD3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.