GATA3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400134-LAC

GATA3 kodiert einen Zinkfinger-Transkriptionsfaktor, der an das GATA-Konsensusmotiv bindet, um linienfestlegende Genprogramme zu regulieren, und spielt eine zentrale Rolle bei der T‑Zell-Differenzierung, der epithelialen Entwicklung und der Biologie der Brustdrüse. In Immunzellen fungiert GATA3 als wichtiger Knotenpunkt der Th2-Polarisierung, indem es die Zytokin-Transkription und die Chromatinzugänglichkeit koordiniert und Signale über JAK/STAT- sowie zytokingetriebene transkriptionelle Netzwerke integriert. In epithelialen Kontexten trägt es zur Differenzierung und Aufrechterhaltung der Zellidentität bei und beeinflusst transkriptionelle Schaltkreise, die sich mit der Signalübertragung von Hormonrezeptoren und Entwicklungswegen überschneiden. Eine dysregulierte GATA3-Aktivität oder -Expression wurde mit veränderten Immunantworten sowie subtypspezifischen Merkmalen von Brust- und anderen epithelialen Krebserkrankungen in Verbindung gebracht, wodurch GATA3 sowohl als Marker als auch als mechanistisches Ziel zur Untersuchung von Differenzierung und transkriptioneller Regulation широко eingesetzt wird.

GATA3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente GATA3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

GATA3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der GATA3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen GATA3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen GATA3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.