Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO gamma Synuclein/SNCG (h): sc-401050
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- gamma Synuclein/SNCG Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique gamma Synuclein/SNCG, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: gamma Synuclein/SNCG Antibody (1H10D2): sc-65979
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO gamma Synuclein/SNCG (h) | sc-401050 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SNCG code pour la gamma-synucléine, une petite protéine associée aux terminaisons présynaptiques, impliquée dans la modulation de l’organisation du cytosquelette, du trafic vésiculaire et des réponses au stress cellulaire. Dans des contextes non neuronaux, l’expression de SNCG a été associée à des modifications de la motilité cellulaire et de la signalisation via des voies qui couplent la dynamique des microtubules au transport membranaire et à la protéostasie. Une dérégulation de la gamma-synucléine a été rapportée dans de nombreux types de tumeurs et elle est souvent étudiée pour ses associations avec l’invasion, des phénotypes liés aux métastases et la résistance au stress cellulaire. En tant que membre de la famille des synucléines, SNCG constitue également un modèle comparatif pour étudier la biologie de l’agrégation protéique et les processus vésiculaires de type synaptique dans divers systèmes cellulaires.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO gamma Synuclein/SNCG (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SNCG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SNCG, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SNCG à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine gamma Synuclein/SNCG.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SNCG pour l'étude de la signalisation de gamma Synuclein/SNCG, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SNCG essentiels à la fonction de gamma Synuclein/SNCG
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SNCG pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le gamma Synuclein/SNCG plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le gamma Synuclein/SNCG plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SNCG. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le gamma Synuclein/SNCG plasmide HDR (h) et le gamma Synuclein/SNCG (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SNCG pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SNCG définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.