Plásmido Doble Nickase (h) galectin-8: sc-401785-NIC

LGALS8 codifica la galectina-8, una lectina de unión a β-galactósidos con repeticiones en tándem que actúa como sensor dependiente de glicanos del daño de membrana y como modulador de las interacciones célula–célula y célula–matriz. La galectina-8 participa en la autofagia selectiva al reconocer glicanos expuestos en endomembranas rotas y reclutar efectores posteriores que promueven la xenofagia y la eliminación de vesículas dañadas. También influye en la señalización de integrinas, la adhesión celular y el tráfico intracelular, conectando el reconocimiento extracelular de glicoproteínas con vías intracelulares de respuesta al estrés. La expresión desregulada de LGALS8 y la señalización mediada por lectinas se han asociado con procesos inflamatorios, interacciones patógeno–huésped y fenotipos relacionados con el cáncer, como la adhesión y la invasión alteradas, lo que respalda estudios mecanísticos en contextos inmunitarios y epiteliales.

galectin-8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LGALS8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LGALS8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LGALS8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LGALS8 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.