Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rβ1: sc-403935-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rβ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GABAA Rβ1 Double Nickase (h) et le plasmide GABAA Rβ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GABRB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GABAA Rβ1 | sc-403935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GABAA Rβ1 | sc-403935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRB1 code la sous-unité β1 du récepteur humain GABA\(_A\), un canal chlorure pentamérique activé par un ligand qui assure la neurotransmission inhibitrice rapide dans le système nerveux central. L’incorporation des sous-unités β est essentielle à l’assemblage du récepteur, à son trafic intracellulaire et à sa localisation synaptique, influençant la conductance au chlore et l’excitabilité neuronale. La signalisation du récepteur GABA\(_A\) interagit avec la plasticité dépendante de l’activité, les oscillations des réseaux et le contrôle homéostatique de l’équilibre excitation–inhibition. Des modifications de l’expression de GABRB1 ou de la composition du récepteur ont été associées, dans des études génétiques et fonctionnelles, à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, soulignant sa pertinence pour les mécanismes impliqués dans l’épilepsie, la déficience intellectuelle et des troubles apparentés.
GABAA Rβ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GABRB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GABRB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GABRB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GABRB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.