Plasmide Double Nickase (m) G-CSF: sc-419844-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) G-CSF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide G-CSF Double Nickase (m) et le plasmide G-CSF Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Csf3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) G-CSF | sc-419844-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) G-CSF | sc-419844-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le facteur stimulant les colonies 3 (Csf3) code le facteur de stimulation des colonies de granulocytes (G-CSF), une cytokine sécrétée qui régule la granulopoïèse et la mobilisation des neutrophiles à partir de la moelle osseuse. Dans les contextes hématopoïétiques et stromaux chez la souris, le G-CSF signale principalement via le récepteur CSF3R afin d’activer les voies JAK/STAT, MAPK/ERK et PI3K/AKT, coordonnant la prolifération, la différenciation et la survie des progéniteurs myéloïdes. Cet axe façonne l’homéostasie de l’immunité innée et les réponses inflammatoires, et des altérations de la signalisation sont couramment étudiées dans des modèles de neutropénie, de susceptibilité aux infections et de myélopoïèse dysrégulée. Csf3 est également utilisé pour explorer la pathologie médiée par les neutrophiles dans des modèles de maladies inflammatoires où les réseaux de cytokines et le trafic myéloïde sont d’importance mécanistique.
G-CSF Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Csf3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Csf3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Csf3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Csf3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.