FUT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409559
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FUT2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FUT2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FUT2 Anticuerpo (9T-8): sc-100742
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FUT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409559 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FUT2 codifica la α(1,2)-fucosiltransferasa 2, una glicosiltransferasa residente en el Golgi que cataliza la fucosilación terminal de los glicanos para generar antígenos H tipo 1/2 en las superficies epiteliales mucosas y en las secreciones. Al controlar motivos de glicanos fucosilados en glicoproteínas y glicolípidos, FUT2 influye en el tráfico de proteínas, las propiedades de la barrera epitelial y las interacciones huésped–microbio en la mucosa intestinal y de las vías respiratorias. La variación genética y la actividad alterada de FUT2 se asocian con el estado secretor y con diferencias relacionadas en los patrones de glicosilación mucosal que se correlacionan con la susceptibilidad a fenotipos infecciosos e inflamatorios. Como regulador clave de eventos de reconocimiento dependientes de glicanos, FUT2 se estudia ampliamente en glicómica, biología del microbioma e inmunología epitelial.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FUT2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FUT2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FUT2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FUT2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FUT2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FUT2 para la investigación de la señalización de FUT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FUT2 críticos para la función de FUT2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FUT2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FUT2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FUT2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FUT2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FUT2 (h) y el plásmido HDR FUT2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FUT2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FUT2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.