FucT-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401795
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FucT-IV O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FucT-IV, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FucT-IV Anticorpo (MY-1): sc-59531
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FucT-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401795 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FUT4 codifica a α1,3-fucosiltransferase FucT-IV, residente no aparelho de Golgi, uma enzima que transfere fucose para aceptores de N-acetilactosamina, gerando epítopos de glicanos fucosilados, como estruturas do tipo Lewis X, em glicoproteínas e glicolipídios. Ao moldar a glicosilação da superfície celular, a FucT-IV influencia a adesão mediada por selectinas, o tráfego de leucócitos e, de forma mais ampla, a sinalização dependente de glicanos e a dinâmica de receptores. A atividade de FUT4 se cruza com o metabolismo da fucose e com vias de glicosilação que regulam interações de células imunes, respostas inflamatórias e migração celular. A expressão desregulada de FUT4 e padrões alterados de fucosilação têm sido associados na literatura à invasividade de células tumorais, a fenótipos de adesão relacionados à metástase e a mudanças nas interações com o microambiente imune, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos da biologia mediada por glicanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FucT-IV (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FUT4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FUT4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FUT4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FucT-IV.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FUT4 para a investigação da sinalização de FucT-IV, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FUT4 críticos para a função FucT-IV
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FUT4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FucT-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FucT-IV Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FUT4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FucT-IV Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FucT-IV (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FUT4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FUT4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.