Plasmide Double Nickase (h) FTSJD1: sc-412604-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FTSJD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FTSJD1 Double Nickase (h) et le plasmide FTSJD1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CMTR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FTSJD1 | sc-412604-NIC | 20 µg | $410.00 |
CMTR2 code FTSJD1, une méthyltransférase 2′-O du ribose spécifique de la coiffe, qui contribue à la maturation des ARNm en modifiant le premier nucléotide transcrit afin de générer des structures Cap1. Cette marque épitranscriptomique favorise une stabilité adéquate des ARN, l’efficacité de la traduction et la discrimination entre ARN du soi et du non-soi, en lien avec les voies de détection de l’immunité innée qui surveillent les défauts de coiffage et de maturation des ARN. L’activité de CMTR2 est donc associée aux interactions hôte–virus et aux réponses au stress cellulaire qui reposent sur une surveillance fidèle du transcriptome. Une dérégulation de la méthylation de la coiffe et des processus connexes de contrôle qualité des ARN a été associée à une altération de la signalisation inflammatoire et à des modifications dépendantes du contexte des programmes d’expression génique, pertinentes pour la biologie des maladies.
FTSJD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CMTR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CMTR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CMTR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CMTR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.