Plasmide Double Nickase (h) FRRS1: sc-406348-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FRRS1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FRRS1 Double Nickase (h) et le plasmide FRRS1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FRRS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FRRS1 | sc-406348-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FRRS1 | sc-406348-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FRRS1 (ferric chelate reductase 1) code une protéine associée à la membrane, impliquée dans la biologie rédox cellulaire et la gestion du fer. Elle favorise la réduction du fer ferrique et influence l’homéostasie intracellulaire des métaux. En agissant sur la disponibilité du fer et l’équilibre oxydatif, FRRS1 peut moduler l’état métabolique et les réponses au stress qui recoupent des voies contrôlant la fonction mitochondriale et les espèces réactives de l’oxygène. Une régulation altérée du fer et du rédox est largement pertinente en neurobiologie et dans d’autres tissus à forte demande énergétique, où une homéostasie métallique perturbée peut accroître la vulnérabilité cellulaire. FRRS1 est donc étudié dans le cadre des mécanismes reliant le métabolisme du fer à la protéostase, à l’intégrité de la signalisation neuronale et à des phénotypes de stress associés aux maladies.
FRRS1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FRRS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FRRS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FRRS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FRRS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.