Plasmide Double Nickase (h) frizzled: sc-401592-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) frizzled-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide frizzled-2 Double Nickase (h) et le plasmide frizzled-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FZD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) frizzled | sc-401592-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) frizzled-2 | sc-401592-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FZD2 code pour le récepteur humain Frizzled-2, un récepteur WNT à sept domaines transmembranaires qui coordonne l’activation, dépendante du ligand, de la signalisation canonique via la β-caténine ainsi que des voies non canoniques de polarité planaire cellulaire et WNT/Ca²⁺. Par ses interactions avec les ligands WNT et des co-récepteurs, FZD2 module la spécification du destin cellulaire, la polarité, la prolifération et le comportement migratoire au cours du développement et de l’homéostasie tissulaire. Une expression ou une signalisation de FZD2 altérées ont été associées à une dérégulation de l’activité de la voie WNT observée dans divers contextes pertinents pour les maladies, notamment les programmes d’EMT associés aux tumeurs et le remodelage tissulaire aberrant. Parce que la signalisation WNT–FZD2 peut remodeler les réseaux transcriptionnels et la dynamique du cytosquelette, FZD2 est fréquemment étudié dans la cartographie des voies, la spécificité récepteur–ligand et les mécanismes contrôlant l’invasion et la différenciation.
frizzled-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FZD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FZD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FZD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FZD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.