FPR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420405

Descripción general

El receptor de péptidos formilados 2 (FPR2; gen *Fpr2*) es un receptor acoplado a proteína G de ratón que reconoce diversos ligandos quimioatrayentes y pro-resolutivos, acoplándose a la señalización de Gi para regular la quimiotaxis, la adhesión y la activación de los leucocitos. La unión a FPR2 modula vías posteriores, entre ellas PI3K/AKT, MAPK/ERK, la movilización de calcio impulsada por PLCβ y la señalización asociada a β-arrestina, configurando la liberación de mediadores inflamatorios y las respuestas de especies reactivas de oxígeno. A través de estos programas, FPR2 contribuye a la vigilancia inmunitaria innata y a la biología de la resolución, con relevancia documentada en el daño tisular inflamatorio, la inflamación asociada a infecciones y la patología impulsada por el sistema inmunitario. Su señalización dependiente del contexto lo convierte en una diana útil para analizar cómo las entradas de los GPCR reprograman el comportamiento de las células mieloides en distintos microambientes inflamatorios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FPR2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fpr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fpr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fpr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FPR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fpr2 para la investigación de la señalización de FPR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Fpr2 críticos para la función de FPR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fpr2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FPR2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FPR2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fpr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FPR2 (m) y el plásmido HDR FPR2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fpr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fpr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.